测定蛋白质含量的方法有哪些?各有何优缺点
();***答案蛋白质含量测定的方法有微量凯氏定氮法、双缩脲法、―酚试剂法、考马斯亮兰法、紫外吸收法等。微量凯氏定氮法:含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸铵。双缩脲法:双缩脲是两个分子脲经℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。―酚试剂法:这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。
蛋白质含量测定的方法有微量凯氏定氮法、双缩脲法、―酚试剂法、考马斯亮兰法、紫外吸收法等。
微量凯氏定氮法:含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸铵。经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。
双缩脲法:双缩脲是两个分子脲经℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中,双缩脲与形成紫色络合物,称为双缩脲反应。
―酚试剂法:这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难,近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。
考马斯亮兰法:年由建立的考马斯亮兰法,是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这一方法是目前灵敏度***的蛋白质测定法。
紫外吸收法:蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在处,其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。
蛋白质含量测定方法有哪些及优缺点,比较三种常见蛋白质含量测定方法的原理和优缺点
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